BUNSEN本生簡述：如何降低Elisa試劑盒誤差率的方法

　　Elisa試劑盒已應用于大分子抗原和小分子抗的定量測定，根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果，認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。不僅適用于醫(yī)學標本的檢查，而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標本。

　　Elisa試劑盒誤差率降低的有效方法：

　　1、使用校對過的微量移液器，排除自然誤差。移液器準確與否對定量檢測尤為重要。

　　2、檢驗技師。應具備從事實驗室操作的基本素質(zhì)和實踐經(jīng)驗。能熟練操作實驗儀器、器械，具有一定總結(jié)和分析問題的能力，對實驗中出現(xiàn)的意外情況能及時妥善解決。

　　3、仔細閱讀說明書。嚴格按照說明書要求進行規(guī)范化操作。ELISA試劑盒不同批號的試劑不可混用。值得改進的地方，反復試驗確定成立后才能改進。

　　4、洗滌干凈。洗板不干凈，酶結(jié)合物本底顯色會呈現(xiàn)假陽性。洗滌液要新鮮，現(xiàn)用現(xiàn)配，陳舊的洗滌液會出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象，也可能出現(xiàn)假陽性。

　　5、嚴控反應時間。反應時間過長，酶失活;反應時間過短，酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結(jié)合，生成物結(jié)構(gòu)松散不牢固，容易洗掉，都可能造成假陰性。

　　6、評估試劑的實用性。試劑的穩(wěn)定與否，對準確率的高低到頭重要。在試劑啟用前，應進行陰、陽對照及樣品反復比照試驗，判定試劑符合要求后方可使用。

　　7、嚴格掌握顯色時間。顯色時間過短，加入終止液反應終止后，底物結(jié)合物的量過少，易出現(xiàn)假陰性。超過顯色要求時間后顯色，應判為假陽性，這可能與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后立即顯色，不可報陽性，這可能是本底顯色的結(jié)果。

　　8、加樣要準確、快速。如果加樣不準確，酶生成物的量不能確定，ELISA試劑盒直接影響顯色結(jié)果。顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和終止液的量有關(guān)，所以加樣應慎重。

　　9、注意ELISA試劑盒保存期，過保存期的試劑不能使用。

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